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                      藥用植物資源與植被恢複學科組和青藏高原特色生物資源工程研究中心聯合研究鐮形棘豆中活性化合物分離方面取得進展
                      2020-07-09 | 【 】【打印】【關閉

                        藏药镰形棘豆(Oxytropis falcata Bunge)(藏药名莪达夏)是豆科棘豆属多年生草本植物。生长在2700~4300 m的河滩、沙地、山坡、草甸,产于青藏高原。镰形棘豆主要具有抗炎止疼、清热解毒、止血等功效,用于利便、除毒、清肿、止血,可治疗麻风病、流感及扁桃体炎等多种病症。由于其突出的疗效,具有“草药之王”的美誉。镰形棘豆是藏医常用的三大抗炎药之一,藏医在临床上使用广泛,它是六味镰形棘豆散、九味青鹏散、奇正藏贴、奇正消痛贴膏的多种藏药复方或藏成药的主要药物,是一味非常具有研究和开发价值的天然药物。目前,镰形棘豆中活性组分与活性化合物不明确,未能阐明药效物质基础,更没有深入探讨活性成分的构效关系。因此,亟需建立镰形棘豆中活性组分与活性化合物的高效快速的分离纯化方法。

                        針對目前鐮形棘豆的研究狀況與存在問題,圍繞鐮形棘豆中活性組分與活性化合物開展研究,並取得了一些進展。

                        1.采用響應面法優化微波提取方法,並得出最佳的提取條件:微波提取功率爲731w,提取時間爲26min,料液比1:26,總黃酮提取率可達1.6%。采用陶瓷膜對鐮形棘豆提取液進行除雜操作,同時采用大孔樹脂吸附技術對陶瓷膜透過液進行富集。最終確定20%的乙醇除去雜質,並用80%的乙醇洗脫樣品並收集樣品溶液,獲得了高含量的黃酮組分。提取工藝的優化爲鐮形棘豆的資源開發提供了研究基礎。

                        2. 建立了高速逆流色谱方法分离纯化镰形棘豆中黄酮化合物的方法;建立了二维制备色谱分离制备镰形棘豆中黄酮化合物的方法。并对分离得到的化合物进行了抗炎活性与抗肝癌细胞活性实验,发现2,4-二羟基-查尔酮与2,4-二羟基-二氢查尔酮具有较好抗肝癌活性,抗癌作用主要是抑制早期细胞凋亡。体外抗炎实验表明镰形棘豆中黄酮类化合物均具有较好的抗炎活性,抗炎活性主要通过降低刺激细胞产生炎性介质,从而减轻炎症反应。

                        上述科研工作得到了青海省科技厅(2015-ZI-729)、中國科學院“关键技术人才”和青海省藏药药理学和安全性评价研究重点实验室的资助。

                        主要專利與論文:
                        1)陳晨,李玉林,劉鳳芹,等,一種從鐮形棘豆中分離制備5種具有抗炎活性化合物的方法,專利號:ZL201710153628.9
                        2)陳晨,李玉林,陳濤,等,一種從鐮形棘豆中分離制備5種黃酮類化合物的方法。專利號:ZL201610244243.9
                        3)陳晨,陳濤,李玉林,等,基于平行分離模式制備色譜分離棘豆中化學對照品的方法,專利號:ZL201511005167.8
                        4)陳晨,李玉林,劉鳳芹,等,基于平行分離模式制備色譜分離棘豆中化學對照品的方法,專利號:ZL201610646239.5
                        5)陳晨,李玉林,張得鈞,等,一種黃酮類藥物組合物及制備方法和用途。專利號:ZL201610244265.5
                        6)Chen Chen, et al. Efficient Separation of Five Flavonoids from Oxytropis falcata Bunge by High-Speed Counter-Current Chromatography and their Anticancer Activity. Acta Chromatographica, 2020,32,189-193. DOI:10.1556/1326.2019.00672. 
                        7)Chen Chen, et al. Separation of 3-Hydroxy-3-Methylglutaryl Flavonoid Glycosides from Oxytropis falcata Using 2D Preparative Chromatography. Journal of Chromatographic Science, 2020, 58, 211-216. DOI:10.1093/chromsci/bmz091.
                         
                        图1 HSCCC技術分離得到5種黃酮類化合物
                        

                       

                        

                        图2 二维色谱技術分離得到黄酮类化合物
                        

                       

                        

                        图3 抗肝癌细胞活性研究

                        

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